a.Dung dịch tẩy rửa được sử dụng để phá vỡ màng tế bào và màng nhân, giải phóng DNA ra khỏi tế bào.

b.Trong nước dứa có enzyme protease, có tác dụng phân giải protein, giúp tách DNA ra khỏi protein. Có thể thay thế nước dứa bằng các dung dịch chứa enzyme protease khác như dung dịch chiết từ đu đủ hoặc kiwi.

c. Cồn ethanol được sử dụng để kết tủa DNA. DNA không tan trong cồn, nên khi cho cồn vào, DNA sẽ kết tụ lại với nhau và tạo thành kết tủa màu trắng.

d.Một số cải tiến có thể thực hiện để thu được kết quả tốt hơn bao gồm:

-Sử dụng cồn ethanol lạnh để tăng hiệu quả kết tủa DNA.

-Nghiền mẫu vật thật kỹ để phá vỡ tối đa các tế bào.

- Khi rót cồn ethanol, rót từ từ theo thành ống nghiệm để tránh làm xáo trộn dung dịch, giúp DNA kết tủa thành một lớp rõ ràng.

1.Mục đích: tách chiết được DNA từ các mẫu vật sống

2.Kết quả và giải thích: Sau thực hiện quy trình thí nghiệm, thấy xuất hiện búi kết tủa trắng đục chứa DNA nằm lơ lửng trong lớp cồn

3.

a, Sử dụng dung dịch tẩy rửa để phá vỡ màng tế bào và làm biến tính protein, loại bỏ tạp chất là protein và lipid,..

b, - Nước dứa có chứa enzyme bromelain, một enzyme protease có khả năng phân cắt protein. Protein là thành phần cấu tạo nên màng tế bào và nhân tế bào, do đó bromelain có thể giúp phá vỡ các màng này và giải phóng DNA ra khỏi tế bào.

- Có thể thay thế nước dứa bằng nước thịt hoặc nước đu đủ.

c, Dùng cồn ethanol để kết tủa dna và loại bỏ tạp chất.

d, - Thực hiện thao tác tách chiết DNA cẩn thận và chính xác theo hướng dẫn.

- Tránh làm hỏng DNA trong quá trình thao tác

a) Có tác dụng phá hủy màng tế bào, màng nhân nhằm giải phóng dịch nhân tế bào vào dung dịch chiết xuất.

b) Vì dịch chiết nước dứa có tác dụng phân cắt chuỗi polypeptide của các protein này thành các amino acid đơn phân hoặc đoạn peptide nhỏ nhờ khả năng phân giải protein của enzyme protease. Có thể thay nước dứa bằng các dung dịch có chứa enzyme protease như dung dịch enzyme protease tinh chế, dung dịch nước đu đủ xanh

c) Việc cho ethanol vào hỗn hợp có tác dụng kết tủa DNA

d) Sử dụng các mẫu vật là mô thực vật hay động vật còn tươi. Đảm bảo thực hiện các thao tác đúng quy trình. Có thể sử dụng ethanol lạnh để tăng hiệu quả gây kết tủa DNA.

a) Tại sao phải sử dung dịch tẩy rửa?

Việc sử dụng dung dịch tẩy rửa có tác dụng phá hủy màng tế bào, màng nhân nhằm giải phóng dịch nhân tế bào vào dung dịch chiết xuất.

b) Tại sao cần sử dụng nước dứa? Có thể thay nước dứa bằng dung dịch gì?

Trong tế bào nhân thực, DNA liên kết với nhiều protein (như histone, các protein điều hòa và phiên mã) nên việc cho dịch chiết nước dứa vào dịch chiết mô có tác dụng phân cắt chuỗi polypeptide của các protein này thành các amino acid đơn phân hoặc đoạn peptide nhỏ nhờ khả năng phân giải protein của enzyme protease có trong dịch chiết nước dứa. Nhờ đó, dung dịch lúc này chỉ còn các đại phân tử DNA và RNA.

Có thể thay nước dứa bằng các dung dịch có chứa enzyme protease như dung dịch enzyme protease tinh chế, dung dịch nước đu đủ xanh,…

c) Tại sao cần sử dụng cồn ethanol?

Việc cho ethanol vào hỗn hợp có tác dụng kết tủa DNA. Do ethanol nhẹ hơn nước, nên khi cho ethanol vào phía trên dịch chiết tế bào sẽ tách thành lớp trong suốt trong ống nghiệm. Lúc này, DNA sẽ đi từ dịch chiết tế bào lên, đẩy sát lại gần nhau và bị kết tủa dưới dạng vật chất có màu trắng đục.

d) Cần phải cải tiến, khắc phục điều gì để thu được kết quả tốt hơn?

Cần lưu ý các điểm sau để thu được kết quả tốt hơn:

- Cần phải sử dụng các mẫu vật là mô thực vật hay động vật còn tươi.

- Nên sử dụng mẫu vật là mô động vật vì mô thực vật thường chứa nhiều nước, ít DNA hơn. Nếu sử dụng mô thực vật cần phải loại bỏ sắc tố trước khi tách chiết. Nên sử dụng mẫu vật là gan gà hoặc gan lợn vừa dễ nghiền, vừa giàu DNA; trước khi cắt nhỏ gan cần loại bỏ lớp màng bao bọc bên ngoài.

- Lựa chọn khối lượng mẫu vật phù hợp: thường là 5 g đối với mô động vật và 50 g đối với mô thực vật.

- Đảm bảo thực hiện các thao tác đúng quy trình.

- Ở bước 5, có thể sử dụng ethanol lạnh để tăng hiệu quả gây kết tủa DNA.

- Có thể kiểm tra và đánh giá hiệu suất tách chiết bằng cách sử dụng các phương pháp như dùng dung dịch diphenylamine ở nhiệt độ cao, đo OD, điện di trên gel agarose, PCR,...

1. Mục đích : Tách chiết được DNA từ mẫu vật sống

2. Kết quả : Xuất hiện kết tủa trắng đục chứa DNA

3.a. Dung dịch tẩy rửa (chất tẩy rửa) có tác dụng phá vỡ màng tế bào và màng nhân, giúp giải phóng DNA ra khỏi tế bào. Chất tẩy rửa làm biến tính các protein, bao gồm cả các enzyme nuclease có thể phân hủy DNA, loại bỏ tạp chất là protein và lipid…

b. Nước dứa chứa enzyme bromelain, có tác dụng cắt các protein histon liên kết với DNA, giúp DNA tách ra khỏi phức hợp protein và dễ dàng kết tủa hơn. Có thể thay thế nước dứa bằng các dung dịch chứa enzyme phân giải protein khác như dung dịch chiết xuất từ đu đủ xanh hoặc dung dịch enzyme trypsin. 

c. DNA không tan trong cồn ethanol. Khi cho cồn ethanol lạnh vào dung dịch chứa DNA, DNA sẽ kết tủa và nổi lên trên, có thể dễ dàng quan sát và thu hoạch. 

d. Cần phải sử dụng cồn ethanol lạnh để tăng hiệu quả kết tủa DNA. Nghiền mẫu vật thật kĩ để phá vỡ tối đa thành tế bào, giúp giải phóng DNA nhiều hơn. Lọc mẫu cẩn thận để loại bỏ các mảnh tế bào lớn, tránh tạp chất lẫn vào DNA. Sử dụng các dung dịch có nồng độ và pH phù hợp để tối ưu hóa quá trình tách chiết.